癌症研究項目進展報告

項目名稱 ： 中國香港頭頸癌患者與人類乳頭突病毒之流行病研究
主要研究人員 ： 香港中文大學公共衛生及基層醫療學院助理教授
左倩儀教授

計劃摘要
 
一些海外研究曾經指出人類乳頭突病毒是頭頸癌的一個重要危險因素及成因，但這些研究尚未有結論性的發現。由於香港女性的人類乳頭突病毒的基因分佈與白種人的並不相同，故我們有需要去確定香港的頭頸癌個案中，是否有同樣的情況。
 
我們這項計劃包括研究 1) 人類乳頭突病毒在頭頸癌患者中的基因分佈以及 2) 研究人類乳頭突病毒的感染和頭頸癌的出現及病情發展的關係。我們會於外科門診招募頭頸癌病人及對照組 (即沒有癌症但根據醫療判斷需要接受手術治療的病人) 參與研究。整個研究分為兩部分，第一部分是病例對照研究，參加者需填寫一份關於生活習慣的問卷，另外亦需要抽取血液及組織樣本作人類乳頭突病毒化驗。我們會跟據病人的年齡、性別及其他危險因素為兩組病人配對立並比較兩組的人類乳頭突病毒感染的比率。第二部份是一個追蹤研究，我們會跟進病毒帶菌者與非帶菌者的頭頸癌病人的情況兩年。其間我們會記錄兩組人的生存率及復發率，然後作出比較。
 
 
計劃進度
 
計劃於2010年1月份開始進行，到目前為止我們已經成功招募190人參與這項研究 (包括確診頭頸癌的組別及沒有癌症但根據醫療判斷需要接受手術治療的對照組別)。填妥的問卷己被記錄及儲存，而血液及組織樣本亦已存放於適當的媒體及環境中，作隨後化驗分析之用。我們已根據為兩組病人進行配對，血液及組織樣本亦已在進行中。
 
 
初步結果及未來工作
 
我們已分析了152個頭頸癌及對照個案的樣本，發現分別有27.7%及32.6%的血液樣本中含有人類乳頭突病毒的抗體， 12.3%及11.5%的組織樣本中含有人類乳頭突病毒。我們會繼續最後階段的化驗工作，並分析人類乳頭突病毒的感染與其他生活習慣之間的關係。我們亦會繼續跟進頭頸癌病人的情況以調查人類乳頭突病毒的存在性對他們的病情發展的影響。


IB受資助癌症研究項目的最終報告

項目名稱 ： 中國香港頭頸癌患者與人類乳頭突病毒之流行病研究
主要研究人員 ： 香港中文大學公共衛生及基層醫療學院助理教授
左倩儀教授

計劃摘要
 
一些海外研究曾經指出人類乳頭突病毒(下簡稱"病毒")是頭頸癌的一個重要危險因素及成因，但這些研究尚未有結論性的發現。由於香港女性的人類乳頭突病毒的基因分佈與白種人的並不相同，故我們有需要去確定香港的頭頸癌個案中，是否有同樣的情況。
 
我們這項計劃包括研究 1)人類乳頭突病毒在頭頸癌患者中的基因分佈以及 2)研究人類乳頭突病毒的感染和頭頸癌的出現及病情發展的關係。整個研究分為兩部分。第一部分是病例對照研究，我們由2010年1月至2011年11月於外科門診(包括廣華醫院、北區醫院、伊利沙伯醫院、基督聯合醫院及威爾斯親王醫院耳鼻喉及頭頸外科)招募年齡18歲或以上的頭頸癌病人及對照組(即沒有癌症但根據醫療判斷需要接受手術治療的病人)參與研究。頭頸癌抱括發生在口唇、舌頭、口腔、咽喉及食道的癌症。鼻咽癌、癌症復發、有其他頭頸癌紀錄或癌症從其他位置擴散至頭頸部分的病人並不包括在內。參加者需填寫一份關於生活習慣的問卷用來分析流行病學的關係。另外參加者亦需要抽取血液及組織樣本作人類乳頭突病毒化驗。我們會跟據病人的年齡，性別及其他危險因素為兩組病人配對並比較兩組的人類乳頭突病毒感染的比率。卡方檢定(Chi-square test)及邏輯回歸(Multi variable logistic regression)會用作統計分析。
 
第二部份是一個追蹤研究，我們會跟進病毒帶菌者與非帶菌者的頭頸癌病人的情況兩年。我們在2010年1月至2012年11月記錄兩組人的生存率及復發率，然後作出比較。Kaplan-Meier 存活分析會用作估計漸增生存機會率。SPSS18會用作統計分析。
 
 
研究結果
 
我們招募了190個頭頸癌及對照個案，當中有150位參加者 (75個頭頸癌病人及75個對照病人) 完成了問卷及抽取血液及組織樣本作人類乳頭突病毒化驗。表格一顯示了參加者的人口統計及生活模式。
 
分析了150位參加者的血液及組織樣本，我們發現在組織樣本中發現的病毒基因比率及血液中的病毒抗體比率，在頭頸癌組別及對照組別都沒有顯著性分別。在頭頸癌組及對照組血液樣本中，發現病毒抗體的比率同為29.3% (22/75)。而在頭頸癌組別當中，組織樣本中的病毒基因比率為9.3%(7/75)，對照組的組織樣本中病毒基因比率則為16%(12/75)。在頭頸癌組襄對病毒抗體測試呈陽性反應的病人當中，有68.2%(15/22)的人對HPV16抗體測試呈陽性反應，對HPV18抗體測試呈陽性的人佔13.6%(3/22)，而對HPV16抗體及HPV18抗體測驗同樣呈陽性的病人佔18.2%(4/22)。在對照組里對病毒抗體測試呈陽性反應的病人當中，有45.5%(10/22)的人對HPV16抗體測試呈陽性反應，對HPV18抗體測試呈陽性的人佔31.8%(7/22)，而對HPV16抗體及HPV18抗體測驗同樣呈陽性的病人佔20.5%(5/22)。我們在7位頭頸癌病人的組織樣本中發現了四種不同的病毒基因，分別是HPV6，16，51及52。在這四種人類乳頭突病毒基因中， HPV16最常見，在7位病人中，有4位受感染(57%)。HPV病毒基因分佈在對照組中跟癌症組很相似， HPV16感染亦最常見，在12位對照組參加者就有10位受感染(83%)。其他人類乳頭突病毒基因型感染，包括HPV51及HPV 52 (請見表2病毒抗體比率/病毒基因比率及表3-病毒基因分佈)。研究發現，病毒感染在不同性別和年齡組別都沒有顯著的分別(見表2)。曾否吸煙或飲酒與病毒感染亦沒有明顯關係(見表2)。
 
為了評估病毒是否頭頸癌的危險因素，我們把參加者跟據病毒測試結果分成4組:病毒抗體呈陰性及病毒基因呈陰性組、病毒抗體呈陽性及病毒基因呈陰性組、病毒抗體呈陰性及病毒基因呈陽性組、病毒抗體呈陽性及病毒基因呈陽性組。性別、年齡組別、教育程度、吸煙及飲用酒精情況亦包括在分析當中。根據國外的研究，人類乳頭突病毒跟口咽癌症有較大關係，因此我們把參加者分為兩組(口咽組及食道組)。由於食道組只有35位參加者，故此人數不足夠有力地解釋病毒和食道癌的關係。而在口咽組中，沒有證據顯示血液中含有病毒抗體或組織中含有病毒基因是頭頸癌的危險因素(見表四)。
 
為分析病毒與頭頸癌的生存率和復發率的關係，我們追蹤癌症組別的病人的情況。追蹤時間中位數為661天(第一四分位數-180天，第三四分位數-816天)。
在追蹤期間，總癌症復發率為14.5% (9/62)。病毒抗體呈陰性及病毒基因呈陰性組的癌症復發率是14.6%(6/41)，病毒抗體呈陽性及病毒基因呈陰性組的復發率則為20%(3/15)。其餘兩個病毒測試組別都是零復發率，但由於其組別人數太少，所以不能有效地比較及作出結論(見表5)。在口咽組中，復發率在不同的病毒測試組別亦沒顯著的分別(見表5)。
 
在75位癌症病人當中，我們成功追蹤73位病人。在追蹤期期間，有37位病人死亡(50.3%)。由於吸煙是癌症生存率的重要因素，我們在作生存率分析時把病人分為曾經吸煙和不會吸煙兩個組別。研究結果顯示，生存率在口咽癌及食道癌組別中有很大的分別(見表5)。
 
在曾吸煙的口咽癌病人當中，只有一位病人在病毒抗體呈陽性及病毒基因呈陽性組中，故此我們只比較其餘三組的生存率。
 
三組病人在確診口咽癌兩年後的生存率有明顯分別。病毒抗體呈陰性及病毒基因呈陰性組的生存率最高，達71.4%，病毒抗體呈陽性及病毒基因呈陰性組的生存率為60%。病毒抗體呈陰性及病毒基因呈陽性組的生存率最低，只有25%(見表6及圖表la)。
 
在不會吸煙的口咽癌組別中，三個組別的生存率並無顯著分別，病毒抗體呈陰性及病毒基因呈陰性組的生存率為84.4%，病毒抗體呈陽性及病毒基因呈陰性組的生存率為61.7%，病毒抗體呈陰性及病毒基因呈陽性組的生存率則為50%(見表6及圖表1b)。
 
在食道癌的組別當中，病人全數分佈在病毒抗體呈陽性及病毒基因呈陰性組以及病毒抗體呈陰性及病毒基因呈陰性組之中。無論在曾吸煙或不曾吸煙的組別裡，病人在確診癌症後兩年的生存率都無明顯分別。
 
在曾吸煙的組別中，病毒抗體呈陽性及病毒基因呈陰性組的生存率是25%，病毒抗體呈陰性及病毒基因呈陰性組的生存率則為33.3%(見表6及圖表2a)。在不曾吸煙的組別裡，兩組的生存率同為零，但由於兩組總人數只有五人，故此結果不能跟其他組別作比較(見表6及圖表2b)。
 
 
初步結果及未來工作
 
人類乳頭突病毒基因的比率及血液中的病毒抗體比率，在頭頸癌組別及對照組別並沒有顯著的分別。沒有證據顯示血液中含有病毒抗體或組織中含有病毒基因是頭頸癌的危險因素。然而，在口咽癌並曾吸煙的組別當中，確診癌症兩年後的生存率在不同的人類乳頭突病毒測試結果組別中有顯著的分別。其中病毒抗體呈陰性及病毒基因呈|陰性組的生存率最高(71.4%)，病毒抗體呈陰性及病毒基因呈陽性組的生存率最低(25%)。建議以更大樣本數進行延伸研究以確實地確定此研究結果。

Table I. Demographic characteristics and lifestyle characteristics

 

Number of subjects (%)

Case

Control

Total

 

75

75

150

Demographic characteristics

Gender

Male

52(66.3)

38(50.7)

90(60)

 

Female

23(30.7)

37(49.3)

60(40)

 

Age

Mean (SD)

62.4(13.6)

58.1(14.3)

 

 

Age group

18-49

13(17.3)

25(33.3)

38(25.3)

 

50-69

35(46.7)

29(38.7)

64(42.7)

 

70 or above

27(36)

21 (28)

48(32)

 

Education level

Primary or below

38(50.7)

30(40)

68(45.3)

 

Secondary

28(37.3)

41(54.7)

69(46)

 

Tertiary or above

9(12)

4(5.3)

13(8.7)

 

Household
monthly income

$5,000 or below

32(45.7)

29(40.3)

61(43)

 

$5,001-10,000

14(20)

13(18.1)

27( 19)

 

$10,001-20,000

16(22.9)

16(22.2)

32(22.5)

 

$20,001-30,000

6(8.6)

8(11.1)

14(9.9)

 

$30,001 or above

2(2.9)

6(8.3)

8(5.6)

 

Lifestyle characteristics

Smoking status

Non-smoker

35(46.7)

54(73)

89(59.7)

 

Ex-smoker

33(44)

16(21.6)

49(32.9)

 

Current Smoker

7(9.3)

4(5.4)

II (7.4)

Chi-Square test for independence P<0.01

Alcohol user

No

33(44.6)

49(66.2)

82(55.4)

 

Yes

41 (55.4)

25(33.8)

66(44.6)

Chi-Square test for independence P<0.01

Diagnosis

Group

Esophageal

22(29.3)

11(14.7)

33(22)

 

Oral-pharyngeal-laryngeal

53(70.7)

64(85.3)

117(78)


Table 2. Prevalence of HPV

 

HPV Prevalence (no. of subject)

HPVantibody

Male

Female

Overall

Case (n=52)

Control
(n=38)

Case
(n=23)

Control
(n=37)

Case (n=75)

Control
(n=75)

Overall prevalence

15 (13)

34.2 (13)

39.1(9)

24.3(9)

29.3(22)

29.3(22)

Prevalence in Subgroup

 

Age group

18-49

27.3(3/11)

28.6(4/14)

0(0/2)

36.4(4/11)

23.1 (3/ 13)

32(8/25)

 

50-69

25(6/24)

47.1 (8/17)

63.6(7/11)

25(3/12)

37. 1 ( 13/35)

37.9(11/29)

 

70 or above

23.5(4/17)

14.3(117)

20(2/10)

14.3(2/14)

22.2(6/27)

14.3(3/21)

 

 

 

 

Smoking
status

Non-smoker

25(3/12)

33.3(7/21)

39.1 (9/23)

18.2(6/33)

34.3(12/35)

24.1(13/54)

 

Ever-smoker

25(10/40)

37.5(6/16)

NA

75(3/4)

25(10/40)

45(9/20)

 

 

 

 

Alcohol
usage

No

23.1 (3/ 13)

26.7(4/15)

35(7/20)

23.5(8/34)

30.3(10/33)

24.5(12/49)

 

Yes

25.6(10/39)

40.9(9/22)

50(1/2)

33.3(1/3)

26.8(11/41)

40(10/25)

 

 

 

 

Diagnosis

Esophageal

22.2(4/18)

33.3(1/3)

25(1/4)

37.5(3/8)

22.7(5/22)

36(4/11)

 

Oral-pharyngeal-laryngeal

26.5(9/34)

34.3(12/35)

42.1 (8/19)

20.7(6/29)

32(17/53)

28.1(18/64)

 

 

 

 

HPV DNA in tissue

Male

Female

Overall

Overall

Case (n=52)

Control
(n=38)

Case
(n=23)

Control
(n=37)

Case (n=75)

Control
(n=75)

11.5(6)

18.4(7)

4.3(1)

13.5(5)

9.3(7)

16(12)

Prevalence in Subgroup

 

 

 

Age group

18-49

27.3(3/11)

28.6(4/14)

0(0/2)

0.27(3/11)

23.1 (3/13)

28(7/25)

 

50-69

4.2(1/24)

11.8(2/17)

9.1(1/11)

0(0/12)

5.7(2/35)

6.9(2/29)

 

70 or above

11.8(2/17)

14.3(1/7)

0(0/10)

14.3(2/14)

7.4(2/27)

14.3(3/21)

 

 

 

 

Smoking
status

Non-smoker

16.7(2/12)

23.8(5/21)

4.3(1/23)

15.2(5/33)

8.6(3/35)

18.5(10/54)

 

Ever-smoker

10(4/40)

12.5 (2/16)

NA

0(0/4)

10 (4/40)

10(2/20)

 

 

 

 

Alcohol
usage

No

7.7 (1/13)

6.7(1/15)

5(1/20)

11.8 (4/34)

6.1 (2/33)

10.2 (5/49)

 

Yes

12.8 (5/39)

27.3 (6/22)

0(0/2)

33.3 (1/3)

12.2(5/41)

28(7/25)

 

 

 

 

 

 

 

 

Diagnosis

Esophageal

0(0/18)

0/(0/3)

0/(0/4)

0(0/8)

0(0/22)

0(0/11 )

 

Oral-pharyngeal-laryngeal

17.6(6/34)

20(7/35)

5.3(1/19)

17.2(5/29)

13.2(7/53)

18.8( 12/64)


Table 3. HPV genotype distribution

 

Number of subject (%)

HPVantibody

HPV Ab genotype

Case (n=22)

Control (n=22)

Total (n=44)

 

HPV16

15(68.2)

10(45.5)

25(56.8)

 

HPV18

3(13.6)

7(31.8)

10(22.7)

 

HPV16 & HPV18

4(18.2)

5(22.7)

9(20.5)

 

 

 

 

 
HPV DNA in tissue HPV DNA genotype

Case (n=7)

Control (n= 1)

Total (n=19)

 

HPV6

1(15.3)

0

1(5.3)

 

HPVI6

4(57)

10(83)

14(73.7)

 

HPV51

1(15.3)

0

1(5.3)

 

HPV52

0

1(8.5)

1(5.3)

 

HPV16, HPV51

0

1(8.5)

1(5.3)

 

HPV51, HPV52

1(15.3)

0

1(5.3)